Skip to content

szpital tarnów urologia ad 5

1 miesiąc ago

115 words

Wyniki oznaczają średnie . SD dla 5 do 12 oocytów na dawkę RNA. Panel B pokazuje wpływ pozakomórkowego stężenia fosforanu na amplitudę indukowanego fosforanem prądu. Maksymalny prąd indukowany fosforanem rejestrowano w oocytach, którym wstrzyknięto 10 ng RNA kodującego NPT2a sekwencją dzikiego typu, V147M lub A48F. Napięte elektrycznie oocyty (potencjał utrzymywania, -50 mV) wystawiono na działanie zwiększających się stężeń fosforanów, podczas gdy indukowana zmiana prądu była stale rejestrowana. Dane przedstawiono jako średnie (. SD) wynik trzech niezależnych eksperymentów, z których każdy obejmował 10 do 14 komórek jajowych. Zmutowane transportery wiązały się ze znacznym zmniejszeniem amplitudy prądu we wszystkich stężeniach fosforanów (P <0,001 na podstawie analizy wariancji dla powtarzanych pomiarów).
Panel C pokazuje wychwyt fosforanu w oocytach. Pobieranie fosforu-32 mierzono w obecności lub braku sodu w oocytach, którym wstrzyknięto 10 ng RNA kodującego sekwencję typu dzikiego, A48F lub V147F lub wstrzyknięto samą wodę. Zależny od sodu wychwyt fosforu był znacznie niższy w oocytach, którym wstrzyknięto RNA A48F lub V147M niż w oocytach, którym wstrzyknięto RNA dzikiego typu, a także był znacznie niższy w oocytach, którym wstrzyknięto RNA A48F niż w tych, którym wstrzyknięto RNA V147M (P <0,001 dla wszystkich trzech porównania). W przypadku braku sodu wychwyt fosforanu nie różnił się istotnie pomiędzy oocytami, którym wstrzyknięto wodę, a tymi, którym wstrzyknięto RNA dzikiego typu lub zmutowanego. Dane przedstawiono jako średnią (. SD) wynik trzech niezależnych eksperymentów, z których każdy przeprowadzono w 10 do 14 oocytach.
Testowaliśmy tę hipotezę dalej, porównując funkcję dzikiego typu i zmutowanego NPT2a wyrażonego w oocytach X. laevis. Wstrzyknięcie RNA do oocytów, w porównaniu z transfekcją cDNA za pomocą wektora ekspresyjnego, umożliwia ekspresję znanych ilości RNA i ocenę funkcji białka za pomocą dwóch niezależnych i komplementarnych metod: pomiar prądów wywołanych fosforanem za pomocą badań elektrofizjologicznych i kwantyfikacja wychwytu fosforanu. NPT2a transportuje trzy jony sodu dla jednego dwuwartościowego jonu fosforanowego.27 W związku z tym wychwyt fosforanu powoduje ruch netto dodatnich ładunków do oocytów, które mogą być rejestrowane jako prąd wewnętrzny w oocytach, którym wstrzyknięto RNA NPT2a.27 W związku z tym wstrzyknięto oocyty ze wzrastającym stężeniem RNA NPT2a typu dzikiego lub zmutowanego (Figura 3A). Prąd wewnętrzny był związany z ilością wstrzykniętego NPT2a RNA, dopóki nie osiągnął plateau 30 ng typu dzikiego lub zmutowanego RNA na oocyt. W obecności stężenia mM fosforanu we wszystkich badanych stężeniach RNA prąd indukowany przez zmutowany NPT2a był niższy niż prąd indukowany przez NPT2a typu dzikiego (Figura 3A). W oocytach, którym wstrzyknięto 30 ng zmutowanego RNA, prąd był o 47 procent mniejszy (w przypadku V147M) i o 65 procent mniejszy (w przypadku A48F) niż prąd w oocytach, którym wstrzyknięto 30 ng RNA typu dzikiego.
Zbadaliśmy również wpływ zwiększenia stężenia pozakomórkowych fosforanów na prąd indukowany fosforanem w oocytach, którym wstrzyknięto 10 ng RNA dzikiego typu lub zmutowanego NPT2a (Figura 3B). Prąd wewnętrzny zwiększał się wraz ze wzrostem stężeń pozakomórkowego fosforanu, osiągając plateau przy mM fosforanie tylko w oocytach eksprymujących dziki NPT2a typu dzikiego; stężenie fosforanów, przy którym prąd wynosił połowę maksymalnej wartości, wynosi 0,55 mM (rysunek 3B)
[patrz też: kosmetyki definicja, usg piersi lodz, kwasy aha i bha ]
[przypisy: kursy dla fizjoterapeutów, wadowice olx, kursy fizjoterapia ]

0 thoughts on “szpital tarnów urologia ad 5”